标准样本准备要求—血清/血浆

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血清样本准备

1.收集全血到血清采集试管中;

2.让血液在室温下凝固,通常需要 15-30 分钟。注意放置不宜超过 60 分钟,凝结的细胞有可能开始溶解;

3.在制冷离心机(2-8°C)中以 1000-2000 x g 离心 10 分钟,以去除血块;

4.立即将血清转移到干净的管中,分装至材质有保障的EP管(≥100ul/管);

5.储存在 -80℃。

 

血浆样本准备

1. 收集全血到市售的抗凝剂处理采集管内(经 EDTA,柠檬酸或肝素处理),注意所有样本应使用同一种采集管;

2. 在制冷离心机(2-8°C)中以 1000-2000 x g 离心 10 分钟,以去除血浆中的细胞;

3.立即将血浆转移到干净的管中,并分装至材质有保障的Ep管中(≥100ul/管);

4.储存在 -80℃。

 

注意:

1.实验样本需包含无细胞的空白培养基

2.如果任何蛋白质预期是高诱导表达的,实验室会对样品做至少包括两个浓度梯度稀释,以检测任何可能的浓度。

 

 

注意事项说明

采样程序的标准化很重要。 任何分析的关键是病例和对照样本在从研究设计和样本收集到数据分析的整个分析过程中得到一致处理。以下是几个会产生影响的因素,准备样本时需要注意:

 

温度:温度是蛋白质处理中的主要影响因素。血浆样本在离心分离前室温(22℃)放置不应超过 1 小时,4°C 放置不应超过 8 小时。样品之间的预离心延迟时间应保持较短且一致,以避免影响;

 

溶血:在大多数情况下,溶血是一种不可避免的分析前效应。 它可能是由于血液样本收集过程中使用的程序以及运输条件和样本制备造成的,需要尽量规避。

 

冻融:长期保存需保障样本保存在-80℃或更低,如中途冻融应保障每个样本的冻融情况一致,以避免不同冻融次数引入的样本差异,生物库应提供每个样本的完整数据跟踪,避免无谓的冻融。

 

一致性:同一项目中的样本类型应保持一致,以使数据具有可比性;同一项目应使用同一种类型采血管;样本采集操作应尽量一致,如血清样本凝固时间、血浆样本离心条件等;样本储存条件应尽量一致,如温度、时间、冻融次数(尽量避免)等。

 

官方白皮书


 


 

2021年11月11日 14:52
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